新生牛血清的解凍方法

      瓶裝新生牛血清解凍需采用緩慢解凍法：把在-15~-40℃低溫冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解凍約1天，待全部解凍后再分裝。在解凍過程中每隔約2小時(shí)可輕輕搖晃均勻(盡量避免產(chǎn)生氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃或更低溫度進(jìn)入37℃水浴解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀，從而使用血清的質(zhì)量下降。

      新生牛血清中的絮狀沉淀物主要是解凍后血清中纖維蛋白及4℃長時(shí)間保存后血清中的脂蛋白變性造成的，這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量，可不用處理。如果必須要處理，可400g離心5分鐘去除。但不宜過濾去除，因?yàn)樾鯛钗锟赡茏枞麨V膜。

      經(jīng)過熱處理的新生牛血清中沉淀物會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像“小黑點(diǎn)”，而且由于這些“小黑點(diǎn)”的布朗運(yùn)動(dòng)在顯微鏡下被放大，感覺是在游動(dòng)，所以經(jīng)常被誤認(rèn)為血清被微生物污染。通常這些小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長，但如果懷疑血清存在微生物污染，則應(yīng)立即停止使用，更換另一批次的血清?？蓪⑦m量血清用培養(yǎng)液稀釋至10%濃度后培養(yǎng)1-3天，觀察小黑點(diǎn)是否急劇增多，或取適量血清在LB平板上涂板培養(yǎng)觀察是否產(chǎn)生菌落，以確定是否存在微生物污染。

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