標準新生牛血清制品作用與解凍熱滅活辦法
標準新生牛血清制品有哪些作用?
①標準新生牛血清可充當pH緩沖劑。
②它是細胞在塑料培養基質上粘附和鋪展所需因子的來源。
③在某種環境中,蛋白質可以與有毒金屬和熱原結合來解毒。
④保證蛋白酶抑制劑,使細胞傳代過程中剩余的胰蛋白酶失活,保護細胞免受損傷。
⑤保證維持細胞指數生長的激素/基本培養基中少量或不含的營養物質和主要的低分子量營養物質。
⑥保證結合蛋白,能識別維生素/脂類/金屬和其他激素等,并能結合或調節它們結合的物質的活力。
標準新生牛血清的解凍、熱滅活辦法下述:
凍存的康那牛血清需逐步解凍:在-20℃至-70℃的低溫冰箱中的血清應在4℃冰箱中溶解一天。隨后移至室溫,待全部溶解后包裝。在溶解的過程中,要輕輕搖勻,注意不要產生氣泡,使溫度和成分均勻,減少沉淀的發生。不要把血清直接從-20℃解凍到37℃,由于溫度變化太大,容易導致蛋白凝集沉淀。
熱滅活是指將完全解凍的血清在56℃加熱30分鐘。加熱過程中定期均勻搖動。這樣的熱處理的目的是使康.那血清中的補體成分失活。通常不推薦這樣的熱處理,由于熱處理會造成血清沉淀明顯增加,也會影響血清的質量。補體參與細胞毒性/平滑肌細胞收縮/肥大細胞和血小板釋放組胺/增強吞噬作用/促進淋巴細胞和巨噬細胞的趨化性和活化。
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